试题:胎牛血清(FBS)是天然的培养基,能够在多种动物卵母细胞的成熟过程中提供足够的营养物质,起到非常好的促进效果。下表是后期胚胎培养液(CR2后液)中添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响情况,下列叙述正确的是( )
血清的不同浓度对牛核移植胚胎发育的影响

A. 囊胚中内细胞团发育成胎膜和胎盘
B. 添加20%FBS是促进核移植胚胎发育的最适浓度
C. 从卵巢采集的卵母细胞需在体外培育成熟
D. 添加不同浓度的FBS对卵裂率和囊胚率均有促进作用
解析:囊胚中滋养层发育成胎膜和胎盘,内细胞团发育成胎儿的各种组织,A错误;由于没有进行更小浓度梯度的实验,因此不能确定20%FBS是否是最适浓度,应该是20%FBS左右是最适浓度,B错误;从卵巢采集的卵母细胞,不具有受精能力,需在体外培育成熟,C正确;表格中数据显示,与对照组相比,30%FBS的浓度对囊胚率具有抑制作用,D错误。故答案为C。
胚胎培养液不仅对胚胎发育有重要作用,而且对胚胎植入后子代的发育也有一定影响。它已成为全球辅助生殖技术(ART)领域关注和研究的热点之一。人类胚胎培养液主要是模拟人类输卵管液体的成分及浓度,并在改良动物胚胎培养液的基础上设计的,能够更好地满足人类胚胎营养的需求。
试管婴儿之父 Robert Edwards早期用于人类胚胎培养的就是添加了同源人类血清的Ham’s F10液(具体的培养液可以查找相关的资料)。
在80年代中期Quinn等人研发的人类输卵管液(HTF)在体外受精(IVF)领域中被广泛地成功应用,随后多种商业化供应的培养液陆续出现。
1.培养液中常见的成分
(1)水
水占了培养液总体成分的99%。培养液对配制的水要求非常高,因为水的质量和纯度会直接影响胚胎的发育,所以培养液内为严格灭菌的净化水。
(2)无机离子
如钙离子、镁离子等,有利于胚胎致密化。
(3)能量底物
主要根据输卵管和宫腔内能量底物的环境而设计。如葡萄糖、丙酮酸、氨基酸等。
(4)激素和生长因子
如黄体生成素、卵泡刺激素、表皮生长因子和胰岛素样生长因子等,可以提高卵母细胞体外成熟率和发育潜能。
(4)蛋白质
目前添加最多的是人类血清白蛋白(HSA),它具有可以稳定和保护胚胎细胞膜、维持胶体渗透压稳定以及防止胚胎附着在胚胎培养皿上等作用。
(5)维生素
调节细胞代谢,阻止不良培养条件对胚胎发育的影响。
2.目前使用最多的胚胎培养液
(1)序贯培养液
根据输卵管内环境的自然变化而设计,包括受精液、卵裂液和囊胚培养液,需要在卵母细胞受精后第一天和第三天分别更换卵裂液和囊胚液。卵裂液的成分可满足胚胎第一至第三天的营养需求,而囊胚培养液的多种成分可以更好地满足囊胚发育的物质需求。
(2)单一培养液
在试管婴儿(IVF)的全过程中使用含有一种配伍的培养液,让胚胎自然选择自身所需营养物质。由于全程不换液,可使胚胎避免渗透压波动或者其他应激影响,并可保留胚胎自身分泌的营养因子。
虽然两种培养液设计的理念有所不同,但都各有所长。在目前的临床应用上并没有明显差别,可能还需要更多临床研究来评估各种培养液的优劣。但无论怎样,每种批号的培养液在使用前都会执行有组织的严格的质量控制体系,比如:培养液的pH、渗透压、清洁度和稳定性测试、内毒素和鼠胚检测(一种评估培养液的检测)等,并及时详细记录检测结果,合格后方可使用。 |