细胞工程

第三节　动物细胞工程及其应用

第三课时    动物细胞融合技术及其应用

1．下列关于植物体细胞杂交和动物细胞融合的叙述，错误的是(　　)

A．植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理中都用到细胞膜的流动性

B．植物体细胞杂交需要用酶解法去除细胞壁

C．诱导原生质体融合的方法和诱导动物细胞融合的方法完全不同

D．植物体细胞杂交最终培育成杂种植株，动物细胞融合没有培育成杂种个体

2.动物细胞融合和植物体细胞杂交比较，下列叙述中正确的是(　　)

A.诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段完全相同

C.所采用的原理完全相同 D.都能形成杂种细胞

3.在植物体细胞杂交和动物细胞融合过程中均运用了酶的催化作用，下列相关叙述正确的是(　　)

A.用纤维素酶、果胶酶将植物细胞制成细胞悬液

B.用胰蛋白酶水解细胞膜表面的糖蛋白，从而使细胞扩散

C.37 ℃条件下，动物细胞融合所用酶的催化活性最高

D.没有纤维素酶和果胶酶，可用解离液代替

4．下面是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称分别为(　　)

A．抗体、T细胞   B．抗原、T细胞

C．抗体、浆细胞   D．抗原、浆细胞

5．下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述不正确的是(　　)

A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原

B．利用PEG诱导融合法、灭活的病毒诱导法和电场诱导融合法等均可诱导细胞融合获得乙

C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长

D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁

6．甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用动物细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。下列相关叙述正确的是(　　)

A．过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲

B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞质膜的选择透过性

C．过程③④的筛选方法相同，细胞丙、丁的遗传物质相同

D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖

7．下列有关单克隆抗体制备的叙述，不正确的是(　　)

A．小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40，其浆细胞的染色体数为40，二者融合后形成的杂交细胞DNA分子数为80

B．在单克隆抗体的制备过程中，至少涉及两次筛选

C．单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养、动物细胞融合等技术

D．浆细胞与骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种融合细胞类型(若仅考虑细胞两两融合的情况)

8．如图为杂交细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT^－)，在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是(　　)

A．可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合

B．两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长

C．杂交细胞需进一步筛选才能用于生产

D．细胞质膜的流动性是细胞融合的基础

9．将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合(只考虑细胞两两融合)后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期的细胞进行镜检，结果如表所示。已知人、鼠细胞的基因型分别为ttHH和TThh，下列叙述正确的是(　　)

A.在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖

B．可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh

C．可以确定①②③的相关基因组成相同

D．可以将T(t)基因定位于人第17号染色体上

10．(多选)人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列有关叙述错误的是(　　)

A．①过程常用灭活的病毒，不可用聚乙二醇

B．②过程筛选出的杂交细胞都能产生抗HCG抗体

C．③过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合

D．④过程需要添加抗生素等物质，以做到无菌、无毒

11．(多选)以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原，采用细胞工程制备单克隆抗体，下列叙述正确的是(　　)

A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清为单克隆抗体

B．体外培养单个浆细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体

C．将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞并不都是产生特定抗体的杂交细胞

D．利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体

12. (多选)下图示为人体抗胃癌单克隆抗体的制备过程。下列有关叙述正确的是(　　)

A.甲是能与人体抗胃癌抗体特异性结合的抗原

B.细胞融合获得乙的原理和植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性

C.用特定选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长

D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得能分泌所需抗体的丁

13.有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：

(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是________________________________。

(2)若a、b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是________，这种育种方法的优点是__________________________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和浆细胞，则d细胞的特点是____________________________________。用特定________以获得d细胞，再经________和________，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是________。

14．甲胎蛋白(AFP)是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一。请回答问题：

(1)细胞①是            ，它与骨髓瘤细胞融合时可使用的化学试剂是                。

(2)细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。浆细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有        种类型。根据上述原理将杂交细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入            。

(3)制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为              技术。

(4)通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是              。